其它菌类检测试剂盒

2012/4/11 11:44:21作者：金剑　摘自：菌类 检测试剂盒 试剂盒　编辑：鲍泽民

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一、检测试剂盒

1.伏马菌素B1试剂盒
本测试盒用间接竞争免疫分析法定量测定玉米中的伏马菌素B1（FB1）。该测试盒反应孔可拆卸，可测单份样品，也可测多份样品，定量分析时需有微孔板酶标仪。

概要
FB1是由串珠镰刀菌产生的真菌毒素，主要污染玉米及其制品。可诱发马的脑白质软化症和猪的肺水肿综合症。FB1对多种动物有肾脏毒性、肝脏毒性作用，对大鼠肝细胞和鸡巨噬细胞有细胞毒性。据报道，FB1与食管癌发病率有明显相关性，国际癌症研究中心把FB1划分到2B组，即人类可能的致癌物。因此FB1对人类健康和畜牧业发展构成潜在威胁，成为继黄曲霉毒素后的又一个研究热点。
目前检测粮食和饲料中FB1的仪器方法有液相色谱、气相色谱、质谱和毛细管电泳法等，这些方法灵敏度较高，结果稳定，但所需仪器设备昂贵，样品准备耗时长，不适于大量样品的筛选。本试剂盒是以应用单克隆抗体为基础的ELISA检测方法，可以准确快速检测玉米中的FB1。

测定原理
本试剂盒用固相酶联免疫吸附原理，利用间接竞争ELISA法进行测定。用抗原包被微孔板，加入FB1标准品或样品、FB1单克隆抗体进行孵育后，将未与包被抗原结合的抗体洗去；再加入酶标记的抗鼠IgG抗体（酶标物）孵育，加入显色液显色，经终止液终止后，用酶标仪在450nm处测定OD值。

提供的物品
微孔板
5个浓度的FB1标准溶液（各1mL）
标准1：0ng/mL ……………………………………………………………直接使用
标准2：50ng/mL ……………………………………………………………直接使用
标准3：100ng/mL …………………………………………………………直接使用
标准4：200ng/mL …………………………………………………………直接使用
标准5：500ng/mL …………………………………………………………直接使用
FB1单克隆抗体溶液(6mL) ……………………………………………直接使用
酶标物(12mL) …………………………………………………………直接使用
显色液(12mL) …………………………………………………………直接使用
终止液(6mL) ……………………………………………………………直接使用
浓缩洗液(30mL) ………………………………………………………稀释使用
空白对照(6mL) …………………………………………………………直接使用

型号规格：96孔/盒

2.副溶血弧菌测试片
适用范围：用于各类食品和原料中副溶血弧菌的检测，以及突发事件应急检测需要。

方法原理：采用一种商品化的一次性培养基产品，含有高选择性培养基、吸水凝胶和特异酶指示剂等重要成分，培养15～24小时就可确认是否有副溶血弧菌的存在。

操作方法
A. 样品处理：取样品 25 mL（g）放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内，充分振摇或置均质器中制成1:10的样品匀液。
B. 接种：将测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置5 min使培养基凝固，最后用手轻轻地压一下。每个样品接种2片。
C. 培 养： 将测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。
D. 结果判别:呈紫红色的菌落为副溶血弧菌。多数非目的菌在测试片上不生长，少数能生长，如创伤弧菌和霍乱弧菌，但菌落呈蓝色，明显区别于目的菌。对于出现阳性菌落的样品，最好用其他方法作进一步的鉴定。

型号规格：24片/包

3.菌落总数测试片
适用范围：可用于各类食品及原料中菌落总数的测定。也可用于与食品接触的容器、操作台和其他设备表面的卫生检测。

方法原理：将营养培养基、凝胶和氯化三苯基四氮唑（TTC）显色剂等加载在试纸片，经加样、培养后，细菌菌落在测试片上显现出红色菌斑，通过计数报告结果。

操作方法
A. 样品处理：无菌称取样品25g（或25mL）放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内，经充分振摇（均质）做成1:10的稀释液。用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，用1mL灭菌吸管反复吸吹制成1:100的稀释液。以此类推，做出1:1000等稀释度的稀释液，每个稀释度更换一支灭菌吸管。
B. 接种：一般食品选2～3个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如食用纯水和矿泉水等）可直接用原液检测。将测试片放在水平台面上，揭开上面的透明薄膜，用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL，均匀加到中央的纸片上，轻轻将上盖膜放下，静置5 min使培养基凝固，最后用手轻轻地压一下。每个稀释度接种两片。
C. 培养： 将测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。

结果判断与计数：
细菌在纸片上生长后会显示红色斑点，选择菌落数适中（10个～100个）的纸片进行计数，乘以稀释倍数后即为每克（或毫升）样品中所含的细菌菌落总数。菌落数在100以内时，按实有数报告。大于100时，用二位有效数字，二位有效数字后面的数字，以四舍五入方法计算，并以10的指数来表示。

计数原则与报告方式
通常选择菌落在10个～100个之间的纸片进行计数，乘以稀释倍数报告之（见下表中例次1）。国家标准菌落总数报告方式术语为cfu/g或mL，cfu的含义为菌落形成单位。
若有两个稀释度的菌落数在10个～100个之内，两者的比值小于2，则取其平均数，若大于2，则采用稀释度小者报告。
若三个稀释度的菌落数都有在10个～100个之内时，应选择二个低数值的平均数。
若三个稀释度的菌落数均小于10个或大于100个时，应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数；或采用均小于数量标准的最小值，或采用均大于数量标准的最大值。

表面取样方法：加1mL灭菌生理盐水在测试片上，静置至少1h使培养基凝固；提起上层膜，使中央滤纸部分贴到待测物表面，用手在外侧轻压；然后将上盖膜合上，置培养箱内培养。

型号规格：24片/包

二、霉菌、酵母菌测试片

适用范围：本品可用于各类食品及饮用水中霉菌和酵母菌的计数。

方法原理：将霉菌营养培养基、吸水凝胶和酶显色剂加载在纸片上，通过培养，在酶显色剂的放大作用下，使霉菌和酵母菌在纸片上显现出出来，通过计数报告结果。

方法特点：与传统方法相比，省去了配制培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作，即开即用，操作简便。培养时间由一周缩短为48h～72h。

方法特点：与传统方法相比，省去了配制培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作，即开即用，操作简便。培养时间由一周缩短为48h～72h。

操作方法
A. 样品处理：无菌称取样品25g（或25mL）放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内，经充分振摇做成1:10的稀释液，用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌水的试管内，用1mL灭菌吸管反复吸吹50次做成1:100的稀释液，以此类推，每个稀释度更换一支灭菌吸管。
B. 接种：
一般食品选2～3个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如食用纯水和矿泉水等）可直接用原液检测。将检验纸片水平放台面上，揭开上面的透明薄膜，用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL，均匀加到中央的滤纸片上，然后轻轻将上盖膜放下，静置5min，每个稀释度接种两片。
用手指先沿方格区边缘刮一下，防止水外流，然后再在中间轻轻推刮，使水分在纸片方格区内均匀分布，并将气泡赶走。
C. 培养：将加了样的检验纸片每12片叠放在一起，放入自封袋中，平放在28℃培养箱内培养48h开始观察计数。
D. 结果判断与计数：霉菌和酵母菌在纸片上生长后会显示蓝色斑点，霉菌菌落显示的斑点略大或有点扩散，酵母菌落则较小而圆滑，许多霉菌在培养后期全呈现其本身特有的颜色。选择菌落数适中（10～50个）的纸片进行计数，乘以稀释倍数后即为每克（或毫升）样品中霉菌和酵母菌的数目。

计数原则及报告方式：
通常选择菌落在10～50个之间的纸片进行计数，乘以稀释倍数报告之。
具体计数原则可参照细菌（菌落）总数的测定方法进行。

型号规格：24片/包

本文关键词：菌类,检测试剂盒,速测盒
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